ಪಾಲಿಯಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳು

· ಪಾಲಿಯಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ಜೆಲ್ ಅನ್ನು ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಮಾನೋಮರ್, ಪಾಲಿಮರೀಕರಣ ಆರಂಭಿಕ ವಸ್ತು, ವೇಗವರ್ಧಕ ಮತ್ತು ಉಪ್ಪು ಮತ್ತು ಬಫರ್ ಮಿಶ್ರಣದ ಬಲದಿಂದ ಒಟ್ಟಿಗೆ ಪಡೆಯಬೇಕು.

· ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ಮತ್ತು BIS (N, N '- ಮೀಥಿಲೀನ್ ಡಬಲ್ ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್) ಜೆಲ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್‌ನ ಮಾನೋಮರ್ ರೂಪವಾಗಿದೆ.

· ಅಮೋನಿಯಂ ಪರ್ಸಲ್ಫೇಟ್ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುತ್ತದೆ. ಅಂಟು ಸೂತ್ರೀಕರಣಕ್ಕೆ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಿದ 10% ಅಮೋನಿಯಂ ಪರ್ಸಲ್ಫೇಟ್ ದ್ರಾವಣದ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಾಹಿತಿಯು ಸಕ್ರಿಯ ಬಳಕೆಯ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, 10% ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಗಮನಾರ್ಹ ನಷ್ಟವಿಲ್ಲದೆ ಹಲವಾರು ವಾರಗಳವರೆಗೆ 4℃ ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಬಹುದು. 10 ಮಿಲಿ ವರೆಗೆ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಅಂಟು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸಲು ವಿಫಲವಾದಾಗ ತ್ಯಜಿಸಿ.

ಸಲಹೆ: ಶೇ.ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ಅನುಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ಅಂಟು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಂಟು ಒಂದೇ ಅಲ್ಲ. ಪೂರ್ವನಿರ್ಮಿತ ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್: ಬಿಐಎಸ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತಿದ್ದರೆ, ಸರಿಯಾದ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ಪಡೆಯುವುದನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ.

· TEMED (N, N, N ', N '- ಟೆಟ್ರಾಮೀಥೈಲ್ ಎಥಿಲೆನೆಡಿಯಾಮೈನ್) ಕಂದು ಬಣ್ಣದ ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾದ ವೇಗವರ್ಧಕವಾಗಿದೆ. ಅಂಟು ಸುರಿಯುವ ಮೊದಲು ಸೇರಿಸಿ.

· ಪಾಲಿಯಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಬಳಸಿದ ಗಾಜನ್ನು ಪ್ರತಿ ಬಾರಿಯೂ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ನಂತರ ತೊಳೆಯಬೇಕು. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ನಂತರ, ಮೃದುವಾದ ಬ್ರಷ್ ಮತ್ತು ಬಟ್ಟೆಯಿಂದ ಬಿಸಿ ಸಾಬೂನು ನೀರಿನಲ್ಲಿ ತೊಳೆಯಿರಿ, ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ತೊಳೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಒಣಗಲು ಇರಿಸಿ.

· ತೇವಾಂಶ ಮತ್ತು ಧೂಳು ಟೊಳ್ಳಾದ ಪಾಲಿಮರ್‌ಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಮಾಡುವ ಮೊದಲು, ಗಾಜಿನ ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ಗ್ಲಾಸ್ ಕ್ಲೀನರ್‌ನಿಂದ ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಮೃದುವಾದ ಬ್ರಷ್‌ನಿಂದ ಒರೆಸಿ. ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ತೊಳೆದು ಪೇಪರ್ ವೈಪ್‌ನಿಂದ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಒಣಗಿಸಿ. ಕಾಗದದಿಂದ ಒರೆಸುವ ಮೊದಲು 70% ಎಥೆನಾಲ್‌ನಿಂದ ತೊಳೆಯುವುದು ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸಲು ಮತ್ತು ಒಣಗಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ವೇಗಗೊಳಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಸೇರಿಸಿ: BIS, ನೀರು, ಬಫರ್ ದ್ರಾವಣ, ಅಮೋನಿಯಂ ಪರ್ಸಲ್ಫೇಟ್, TEMED. ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ ಮತ್ತು ತಕ್ಷಣ ಸುರಿಯಿರಿ.

ಪಾಲಿಮರೀಕರಣಕ್ಕೆ ಮುನ್ನ ಪಾಲಿಅಕ್ರಿಲಮೈಡ್ ಅನ್ನು ಅನಿಲದಿಂದ ಮುಕ್ತಗೊಳಿಸುವ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ. (ಆಮ್ಲಜನಕವು ಪಾಲಿಮರೀಕರಣವನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವುದರಿಂದ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಅಕ್ರಿಲಮೈಡ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ವಾತದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು.)

ಅಡ್ಡಲಾಗಿರುವ ಅಂಟು ಬಿಂದು ಮಾದರಿ ಸಲಹೆಗಳು.

· ಕೆಳಗಿನ ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯಲ್ಲಿ ಕಪ್ಪು ಕಾಗದದ ತುಂಡನ್ನು ಹಾಕಿ, ಕಪ್ಪು ಹಿನ್ನೆಲೆಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ನೋಡಲು ಕೆಲವು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ಮಾಡಿ.
· ಅಂಟು ಟ್ಯಾಂಕ್ ತುಂಬಿದ ಬಫರ್, ಕೊಲಾಯ್ಡ್ ಮೇಲೆ ಸ್ವಲ್ಪ ಮೇಲಿರುತ್ತದೆ.
· ಅಂಚಿನಲ್ಲಿ ದೀಪವಿದ್ದರೆ, ದೀಪಗಳನ್ನು ಆನ್ ಮಾಡಿ, ಬೆಳಕು ಕೊಲಾಯ್ಡ್ ಆಗಿ ಹೊಳೆಯಲಿ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪೈಪೆಟ್‌ಗೆ ಎಳೆಯಿರಿ.
· ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ಪೈಪೆಟ್ಟಿಂಗ್ ಸಾಧನವನ್ನು ಬಳಸುವುದು.
· 10-200 mu ನಲ್ಲಿ 1 ದ್ರವ ಚಲಿಸುವ ಬಿಂದುವನ್ನು ಮಾದರಿಯ ಹೆಚ್ಚಿನ ಬಿಂದುಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಬಹಳ ಸಣ್ಣ ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರಗಳಿಗೆ (10μ1 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ), ಅಂಟು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲು ಬಳಸುವ ಉದ್ದವಾದ ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್ ಹೆಚ್ಚು ಅನುಕೂಲಕರವಾಗಿದೆ.

· ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಪೈಪ್ ಹಾಕುವುದು, ನಿಧಾನವಾಗಿ ಚಲಿಸುವ ದ್ರವವನ್ನು ಉಸಿರಾಡುವುದು. ಮಾದರಿಯು ಗ್ಲಿಸರಿನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಜಿಗುಟಾಗಿ ಕಾಣಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ವೇಗವಾಗಿ ಪಂಪ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್‌ಗೆ ಗಾಳಿಯ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ಎಳೆಯಬಹುದು.

· ಮಾದರಿಗಳು ಪೈಪ್‌ಟೆಟಿಂಗ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಉಸಿರಾಡಿದ ನಂತರ, ದ್ರವದ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಪೈಪ್‌ನ ಅಂಚಿನಲ್ಲಿ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಚಲಿಸುತ್ತವೆ ಅಥವಾ ಕಾಗದವನ್ನು ಒರೆಸುವ ಮೂಲಕ ಹನಿಗಳ ಹೊರಗೆ ದ್ರವದ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಹೀರುತ್ತವೆ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹೀರದಂತೆ ಜಾಗರೂಕರಾಗಿರಿ.

ಮಾದರಿಯನ್ನು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ

· ಸ್ವಲ್ಪ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಇರಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಪೈಪ್ ಹಾಕುವ ಸಾಧನ, ಮಾದರಿಗಳು ಓವರ್‌ಫ್ಲೋ ದ್ರವದ ತಲೆಯನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪ ಚಲಿಸುವಂತೆ ಮಾಡಿ.
· ಬಫರ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾದ ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಹೆಡ್, ಸ್ಪಾಟ್ ಹೋಲ್‌ಗಳಿಗಿಂತ ಸ್ವಲ್ಪ ಎತ್ತರದಲ್ಲಿ, ಧನಾತ್ಮಕ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಕಾಯ್ದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಪೈಪೆಟ್‌ನ ತುದಿಯನ್ನು ಸಣ್ಣ ರಂಧ್ರಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಬಹುದು.
· ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ. ಪೈಪೆಟ್ ತುದಿಯನ್ನು ಪಾಯಿಂಟ್ ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯು ರಂಧ್ರದೊಳಗೆ ಮುಳುಗುತ್ತದೆ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಒಳಗೆ ತಳ್ಳುವ ಬದಲು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ತುಂಬಲು ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ಮುಳುಗಲು ಬಿಡಿ.
· ದ್ರವದ ಹೆಡ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಮಾದರಿಯ ಕೊನೆಯ ಹನಿಯನ್ನು ಒಮ್ಮೆ ಹಾಕಿದ ನಂತರ, ದ್ರವವು ಎರಡನೇ ಲೆಗ್‌ಗೆ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ, ನಿಧಾನವಾಗಿ ದ್ರವದ ಚಲನೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಬಫರ್‌ನಿಂದ ಹೊರಗೆ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ.

ಲಂಬವಾದ ಅಂಟು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹೇಗೆ ಮಾಡುವುದು?

· ಎರಡು ಗಾಜಿನ ತುಂಡುಗಳ ನಡುವೆ ಲಂಬವಾದ ಅಂಟು ಬಿಂದು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರಗಳನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ. ತುಂಬಾ ತೆಳುವಾದ ಅಂಟುಗಳಲ್ಲಿ, ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಎರಡು ಗಾಜಿನ ತಟ್ಟೆಗಳ ನಡುವೆಯೂ ಸೇರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಗ್ಲಿಸರಿನ್ ಅನ್ನು ವೀಕ್ಷಿಸಿ! ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದೊಳಗೆ ಮುಳುಗುತ್ತದೆ.
· ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹಾಕುವ ಮೊದಲು, ಪಾಲಿಪ್ರೊಪಿಲೀನ್ ಅಸಿಲ್ ಜೆಲ್ ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದ ಲಂಬ ಬಿಂದುವನ್ನು ಹಾಕಲು ಮರೆಯದಿರಿ, ಅದನ್ನು ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸಿ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪಾಲಿಮರೀಕರಿಸದ ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದಾದ ನೀರನ್ನು ತೊಳೆಯಿರಿ. ನೀರು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿಸಬಹುದು. 25 ಮಿಲಿ ಅಥವಾ 50 ಮಿಲಿ ಸಿರಿಂಜ್ ಮತ್ತು 18-ಗೇಜ್ ಸೂಜಿಯನ್ನು ಬಳಸಿ. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಸುರಿಯಿರಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ಫ್ಲಶ್ ಮಾಡಿ.
· ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ನೋಡುವುದು ಕಷ್ಟವಾಗಬಹುದು, ಆದರೆ ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಉಳಿದವು ಸುಲಭ. ಹೆಚ್ಚುವರಿ ರಂಧ್ರಗಳಿದ್ದರೆ, ಮಾದರಿ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬ್ರೋಮೋಫೆನಾಲ್ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣದಿಂದ ಪರೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು.