ಪಾಲಿಅಕ್ರಿಲಮೈಡ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ಗೆ ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳು

· ಪಾಲಿಅಕ್ರಿಲಮೈಡ್ಜೆಲ್ ಅನ್ನು ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಮೊನೊಮರ್, ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಆರಂಭಿಕ ವಸ್ತು, ವೇಗವರ್ಧಕ ಮತ್ತು ಉಪ್ಪು ಮತ್ತು ಬಫರ್ ಮಿಶ್ರಣದ ಬಲದಿಂದ ಮಾಡಬೇಕು.

· ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ಮತ್ತು BIS (N, N '- ಮೀಥಿಲೀನ್ ಡಬಲ್ ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್) ಮೊನೊಮರ್ ರೂಪ ಜೆಲ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಆಗಿದೆ.

· ಅಮೋನಿಯಂ ಪರ್ಸಲ್ಫೇಟ್ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುತ್ತದೆ. ಅಂಟು ಸೂತ್ರೀಕರಣಕ್ಕೆ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಲಾದ 10% ಅಮೋನಿಯಂ ಪರ್ಸಲ್ಫೇಟ್ ದ್ರಾವಣದ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಾಹಿತಿಯು ಸಕ್ರಿಯ ಬಳಕೆಯ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, 10% ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಹಲವಾರು ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಗಮನಾರ್ಹ ನಷ್ಟವಿಲ್ಲದೆ 4℃ ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಬಹುದು. 10 ಮಿಲಿ ವರೆಗೆ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಅಂಟು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸಲು ವಿಫಲವಾದಾಗ ತಿರಸ್ಕರಿಸಿ.

ಸಲಹೆ: ಶೇಕಡಾವಾರುಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ಅನುಕ್ರಮ ಅಂಟು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಂಟು ಒಂದೇ ಅಲ್ಲ. ಪ್ರಿಮೇಡ್ ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್: ಬಿಐಎಸ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತಿದ್ದರೆ, ಸರಿಯಾದ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ.

· TEMED (N, N, N ', N '- tetramethyl ethylenediamine) ಒಂದು ವೇಗವರ್ಧಕವಾಗಿದ್ದು, ಕಂದು ಬಣ್ಣದ ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ, ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂಟು ಸುರಿಯುವ ಮೊದಲು ಸೇರಿಸಿ.

· ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ನಲ್ಲಿ ಪಾಲಿಯಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಬಳಸಿದ ಗಾಜಿನನ್ನು ಪ್ರತಿ ಬಾರಿ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ನಂತರ ತೊಳೆಯಬೇಕು. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ನಂತರ, ಬಿಸಿ ಸಾಬೂನು ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಮೃದುವಾದ ಬ್ರಷ್ ಮತ್ತು ಬಟ್ಟೆಯಿಂದ ತೊಳೆಯಿರಿ, ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ತೊಳೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಒಣಗಲು ನಿಂತುಕೊಳ್ಳಿ.

· ತೇವಾಂಶ ಮತ್ತು ಧೂಳು ಟೊಳ್ಳಾದ ಪಾಲಿಮರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಮೊದಲು, ಗ್ಲಾಸ್ ಕ್ಲೀನರ್ನೊಂದಿಗೆ ಗಾಜಿನ ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಮೃದುವಾದ ಬ್ರಷ್ನಿಂದ ಅದನ್ನು ಒರೆಸಿ. ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ತೊಳೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಕಾಗದದ ಒರೆಸುವ ಮೂಲಕ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಒಣಗಿಸಿ. ಕಾಗದದಿಂದ ಒರೆಸುವ ಮೊದಲು 70% ಎಥೆನಾಲ್ನೊಂದಿಗೆ ತೊಳೆಯುವುದು ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸಲು ಮತ್ತು ಒಣಗಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ವೇಗಗೊಳಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಸೇರಿಸಿ: BIS, ನೀರು, ಬಫರ್ ದ್ರಾವಣ, ಅಮೋನಿಯಂ ಪರ್ಸಲ್ಫೇಟ್, TEMED. ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ ಮತ್ತು ತಕ್ಷಣ ಸುರಿಯಿರಿ.

ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಮೊದಲು ಪಾಲಿಅಕ್ರಿಲಮೈಡ್ ಅನ್ನು ಡಿಗ್ಯಾಸ್ ಮಾಡುವುದು ಅನಿವಾರ್ಯವಲ್ಲ. (ಆಕ್ಸಿಜನ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣವನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವ ಕಾರಣ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ವಾತದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.)

ಅಡ್ಡಲಾಗಿರುವ ಅಂಟು ಪಾಯಿಂಟ್ ಮಾದರಿ ಸಲಹೆಗಳು.

ಕೆಳಗಿನ ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯಲ್ಲಿ ಕಪ್ಪು ಕಾಗದದ ತುಂಡನ್ನು ಹಾಕಿ, ಹೆಚ್ಚು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ನೋಡಲು ಕೆಲವು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ಮಾಡಲು ಕಪ್ಪು ಹಿನ್ನೆಲೆ.
· ಅಂಟು ಟ್ಯಾಂಕ್ ತುಂಬಿದ ಬಫರ್, ಕೊಲಾಯ್ಡ್ ಮೇಲೆ.
· ಅಂಚಿನಲ್ಲಿ ಬೆಳಕು ಇದ್ದರೆ, ದೀಪಗಳನ್ನು ಆನ್ ಮಾಡಿ, ಬೆಳಕು ಕೊಲೊಯ್ಡ್ ಅನ್ನು ಹೊಳೆಯುವಂತೆ ಮಾಡಿ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪೈಪೆಟ್ನಲ್ಲಿ ಎಳೆಯಿರಿ.
· ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ಪೈಪ್ಟಿಂಗ್ ಸಾಧನವನ್ನು ಬಳಸುವುದು.
· 10-200 mu 1 ದ್ರವ ಚಲಿಸುವ ಬಿಂದುವನ್ನು ಮಾದರಿಯ ಹೆಚ್ಚಿನ ಬಿಂದುಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಸಣ್ಣ ಮಾದರಿಯ ರಂಧ್ರಗಳಿಗೆ (10μ1 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ), ಅಂಟು ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಉದ್ದವಾದ ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್ ಹೆಚ್ಚು ಅನುಕೂಲಕರವಾಗಿದೆ.

· ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಕೇವಲ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಮುಳುಗಿ, ನಿಧಾನವಾಗಿ ಚಲಿಸುವ ದ್ರವವನ್ನು ಉಸಿರಾಡುವುದು. ಮಾದರಿಯು ಗ್ಲಿಸರಿನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಜಿಗುಟಾದಂತೆ ಕಾಣಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಕ್ಷಿಪ್ರ ಪಂಪಿಂಗ್ ಗಾಳಿಯ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್‌ಗೆ ಸೆಳೆಯಬಹುದು.

· ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಉಸಿರಾಡಿದ ನಂತರ ಮಾದರಿಗಳು, ದ್ರವದ ತಲೆಯನ್ನು ಪೈಪ್‌ನ ಅಂಚಿನಲ್ಲಿ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ ಅಥವಾ ಒರೆಸುವ ಕಾಗದವು ಹನಿಗಳ ಹೊರಗೆ ದ್ರವದ ತಲೆಯನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹೀರದಂತೆ ಎಚ್ಚರಿಕೆ ವಹಿಸಿ.

ಮಾದರಿಯನ್ನು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ

· ಸ್ವಲ್ಪ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಇರಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಪೈಪ್ಟಿಂಗ್ ಸಾಧನ, ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪ ಓವರ್‌ಫ್ಲೋ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಚಲಿಸುವಂತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
· ಬಫರ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾದ ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಹೆಡ್, ಸ್ಪಾಟ್ ಹೋಲ್‌ಗಳಿಗಿಂತ ಸ್ವಲ್ಪ ಹೆಚ್ಚು, ಧನಾತ್ಮಕ ಒತ್ತಡವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಪೈಪೆಟ್ನ ತುದಿಯನ್ನು ಸಣ್ಣ ರಂಧ್ರಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಬಹುದು.
· ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಮಾದರಿಗಳು ಔಟ್. ಪೈಪೆಟ್ ತುದಿಯನ್ನು ಪಾಯಿಂಟ್ ಮಾದರಿಯ ರಂಧ್ರದ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯು ರಂಧ್ರಕ್ಕೆ ಮುಳುಗುತ್ತದೆ. ಒಳಗೆ ತಳ್ಳುವ ಬದಲು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ತುಂಬಲು ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ಸಿಂಕ್ ಮಾಡಲಿ.
ದ್ರವದ ತಲೆಯೊಂದಿಗೆ ಮಾದರಿಯ ಕೊನೆಯ ಡ್ರಾಪ್ ಒಮ್ಮೆ, ದ್ರವವು ಎರಡನೇ ಕಾಲಿಗೆ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ, ನಿಧಾನವಾಗಿ ದ್ರವದ ಚಲನೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಬಫರ್‌ನಿಂದ ಹೊರಕ್ಕೆ ಸರಿಯುತ್ತದೆ

ಲಂಬವಾದ ಅಂಟು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹೇಗೆ ಮಾಡುವುದು?

· ಎರಡು ಗಾಜಿನ ತುಂಡುಗಳ ನಡುವೆ ರೂಪುಗೊಂಡ ಲಂಬವಾದ ಅಂಟು ಬಿಂದು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರಗಳು. ತುಂಬಾ ತೆಳುವಾದ ಅಂಟುಗಳಲ್ಲಿ, ಎರಡು ಗಾಜಿನ ಫಲಕಗಳ ನಡುವೆ ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಕೂಡ ಸೇರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಗ್ಲಿಸರಿನ್ ವೀಕ್ಷಿಸಿ! ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದ ಮೇಲೆ ಪೈಪೆಟ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ಹಾಕಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯು ರಂಧ್ರಕ್ಕೆ ಮುಳುಗುತ್ತದೆ.
· ಪಾಯಿಂಟ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಮೊದಲು, ಪಾಲಿಪ್ರೊಪಿಲೀನ್ ಅಸಿಲ್ ಜೆಲ್ ಮಾದರಿಯ ರಂಧ್ರದ ಲಂಬ ಬಿಂದುವನ್ನು ಹಾಕಲು ಮರೆಯದಿರಿ ಕ್ಲೀನ್ rinsed ಇದೆ. ಪಾಲಿಮರೀಕರಿಸದ ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರದ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ನೀರನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಿ. ನೀರು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿಸಬಹುದು. 25ml ಅಥವಾ 50ml ಸಿರಿಂಜ್ ಮತ್ತು 18-ಗೇಜ್ ಸೂಜಿಯನ್ನು ಬಳಸಿ. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಬಫರ್ನಲ್ಲಿ ಸುರಿಯಿರಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ಫ್ಲಶ್ ಮಾಡಿ.
· ಮಾದರಿ ರಂಧ್ರವನ್ನು ನೋಡಲು ಕಷ್ಟವಾಗಬಹುದು, ಆದರೆ ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಉಳಿದವು ಸುಲಭವಾಗಿದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿ ರಂಧ್ರಗಳಿದ್ದರೆ, ಮಾದರಿ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬ್ರೋಮೊಫೆನಾಲ್ ನೀಲಿಯೊಂದಿಗೆ ಪರೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು.